医学免疫学实验教程

出版时间:2012-8  出版社:科学出版社  作者:廖纪元,王希君 著  

内容概要

  《医学免疫学实验教程》作为高等医药院校实验教材使用,内容主要介绍免疫细胞与免疫分子的检测,涉及部分经典免疫学实验,如沉淀反应、凝集反应、免疫标记技术;科研基础性实验,如免疫细胞分离、培养以及功能测定技术以及动物模型建立、创新研究型实验的立题等内容。

书籍目录

第一篇概述 一、实验室规则 二、实验意外事故的紧急处理 三、油镜的使用与保护 第二篇分子免疫学实验 实验一特异性抗体的制备 一、兔抗羊红细胞免疫血清(溶血素)的制备 二、兔抗人IgG免疫血清的制备 实验二免疫血清的鉴定与纯化 一、兔抗SRBC免疫血清(溶血素)的鉴定 二、免疫血清的纯化一 实验三凝集反应 一、直接凝集反应 二、间接凝集反应 实验四沉淀反应 一、单向免疫扩散试验 二、双向免疫扩散试验 三、对流免疫电泳试验 四、火箭免疫电泳试验 五、免疫电泳试验 六、免疫比浊试验 实验五免疫标记技术 一、免疫荧光技术 二、酶联免疫吸附实验(间接法) 三、酶联免疫吸附实验(双抗原夹心法) 四、酶联免疫吸附实验(双抗体夹心法) 五、放射免疫技术 实验六补体参与的免疫反应 一、补体溶血反应 二、血清总补体溶血活性(CH50)测定 实验七溶血空斑形成试验 实验八细胞因子检测 白细胞介素—2的诱生与生物学活性检测 第三篇细胞免疫学实验 实验九细胞计数方法 实验十人外周血单个核细胞的分离 实验十一小鼠脾细胞的制备 实验十二小鼠腹腔巨噬细胞的分离与制备 实验十三T细胞、B细胞的分离 一、E花环分离法 二、尼龙棉柱法分离法 实验十四E花环形成实验 实验十五淋巴细胞亚群的检测 实验十六淋巴细胞增殖反应 一、MTT比色法 二、3H—TdR掺入法 实验十七混合淋巴细胞培养 实验十八NK细胞活性的检测 一、乳酸脱氢酶释放法 二、放射性核素51Cr释放法 实验十九中性粒细胞吞噬功能测定 第四篇动物免疫学实验 实验二十 免疫实验相关动物模型的建立 一、免疫功能低下动物模型的建立 二、荷瘤动物模型的建立 实验二十一豚鼠过敏反应的观察 第五篇设计性实验 一、设计性实验的选题、设计与实施 二、设计性实验参考选题 附录免疫学实验常用试剂的配制 参考文献

章节摘录

版权页:   插图:   (二)实验设计的原则及步骤 设计性实验的一个重要组成部分是实验设计。实验设计是关于实验研究的计划和方案的制定,是对实验研究所涉及的各项基本问题的合理安排,是实验研究能否获得预期结果的重要保证。 1:实验设计原则 (1)对照与均衡原则:对照即对比。在设立实验组同时,须设立作为比较参照的对照组。对照的意义在于:①鉴别处理因素与非处理因素之间的差异;处理因素效应的大小,重要的不是其本身,而是通过对比后得出的结论,所以要做到正确的鉴别,设立对照必不可少。②消除和减少实验误差;在某些实验中,自然环境和实验条件等对实验结果有很大影响,同时实验动物的个体差异也使实验条件难以完全统一,设立对照有利于使实验组和对照组的非处理因素基本处于相同状态,从而减少或消除实验误差。 对照有多种形式,根据实验研究目的予以选择,注意对照设置尽量要全面: 1)空白对照:亦称正常对照,对照组不加任何处理因素。如观察某降脂药的作用时,实验组动物服用降脂药,对照组动物不服药或服安慰剂。 2)自身对照:指对照组与实验组是在同一动物上进行。例如,用药前后的对比,即为自身对照。 3)相互对照:又称组间对照。指在几个实验组之间相互对照。如用几种不同降压药物处理动物,对比这几种药物的效果,即为相互对照。 4)标准对照:指实验结果与标准值对比。 在医学实验中,一般不仅要求设置合理的对照,而且要遵循均衡原则。所谓均衡,就是在相互比较的各组间(实验组与对照组间、实验组与实验组间),除了要研究的处理因素外,其余因素特别是可能影响实验结果的因素需要尽量相同,这样才能有效减少实验误差。 (2)随机原则:分配于实验组或对照组的对象是由实验对象的总体中任意抽取的。如果在同一实验中存在数个处理因素(如先后观察多种药物的作用),则各处理因素施加顺序的机会也是均等的。通过随机化,一是尽量使抽取的样本能够代表总体,减少抽样误差;二是使各组样本的条件尽量一致,消除或减少组间误差,从而使处理因素产生的效应更加客观,便于得出正确的实验结果。 (3)重复原则:重复是保证科研结果可靠性的重要措施。由于实验中的主客观原因,一次实验结果往往不够确实可靠,需要多次重复实验方能获得可靠的结果。具有重复性的实验结果具备更强的说服力。 2.实验设计的步骤 (1)明确实验目的:明确实验要解决什么问题,预期要取得何种成果。其理论依据是什么,有何意义(必要性和重要性),还存在什么问题需要解决。 (2)选择合理的实验对象:实验对象选择合适与否与实验误差大小甚至实验成败有很大关系。

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