抗体制备与使用实验指南

出版时间:2010-8  出版社:科学出版社  作者:(美)霍华德,(美)凯瑟 著,张权庚 等译  页数:293  

前言

  抗体可称为在地球上生命的发展历史中最重要的一群蛋白。这些“魔弹”已经成为生物学和医学研究中不可或缺的工具。在近25年生物学领域所收获的重要知识的浪潮中,抗体起着关键性的作用,而在医学实践方面,各种各样疫苗的研究成功和使用已经使多种传染性疾病得到了控制(至少在发达国家是这样),例如脊髓灰质炎、腮腺炎、麻疹、水痘等,并且已基本使天花绝迹。  我们希望本书对生物医学领域的研究人员和学生有所帮助。尽管未来在制备和使用抗体方面一定还会出现新的方法,但目前抗体的使用方法,如酶联免疫试验(ELISAs)、蛋白质印迹方法(Western Blot)、免疫组化、流式细胞术等,其功能是如此强大,以致于在未来相当长的时间内这些技术方法仍将对生物医学科学领域起着关键作用。  我们想在此对本书的所有作者表达深切谢意,在他们杰出的专业知识,优秀的写作和对本书的热心支持下,本书的出版才成为可能。我们也想在此深切感谢CRC出版公司负责本书出版工作的编辑Judith Spiegel,感谢她对本书的诸多帮助和极大的耐心。

内容概要

本书收集了抗体制备与使用中的基本实验方法及相关的最新科研进展,这些方法是开展抗体制备研究的必备知识,包括鼠源性单克隆抗体的制备、纯化、应用以及抗体的修饰等,同时也包括部分基因重组性单克隆抗体,涉及内容具体、全面,反映了国际上的最新发展方向。    本书对从事生物学、免疫学、生物化学与分子生物学、医药卫生科学领域的科研技术人员,以及高等院校师生具有参考价值。

书籍目录

译者序前言第1章  抗体  1.1  一种多功能分子——抗体  1.2  相关伦理思考  1.3  实验室安全  1.4  手册编排  参考文献第2章  抗原第3章  佐剂第4章  多克隆抗体制备第5章  单克隆抗体的制备第6章  单克隆抗体的定量生产第7章  抗体的纯化和鉴定第8章  细菌中制备抗体第9章  抗体的化学和蛋白水解修饰第10章  抗体的应用第11章  免疫组织化学法第12章  免疫电子显微镜第13章  流式细胞术第14章  酶联免疫吸附试验第15章  抗体的未来:挑战与机遇索引彩图

章节摘录

  2.2多肽抗原  多肽无疑是生产抗原的最快方式,可用于免疫接种来制备抗体。许多机构和公司发现保持核心多肽合成的能力经济有效。如果不具备多肽合成能力,一些商业公司提供多肽合成定制服务。这种方法可靠、经济,可在几周之内提供高质量的多肽,其数量足以用于免疫接种。对于典型的多肽免疫原,大约500美元可以买到10mg含15个氨基酸并且纯度>80%的多肽(circa 2005),这些多肽足够免疫几个动物来得到抗体,并用酶联免疫吸附试验进行抗体筛选。  多肽可以特别有效地提高抗体对抗原某区域的特异性,如新的结构域或同源性最低的区域。当抗原没有其他来源的时候,也可使用多肽。许多情况下,重组蛋白因为不能被表达和纯化而不能作为抗原的来源。对于大分子跨膜蛋白,如G蛋白偶联受体(在制药领域重要的分子家族)来说这是经常发生的,对应胞外结构域蛋白环状结构的短肽已被证明是可行的免疫原,可以产生针对这些复杂分子的抗体。  由6个氨基酸组成的肽可以用来制备抗血清,由10~12个氨基酸残基组成的多肽通常有更高的免疫原性[2]。一个较短的抗原表位的例子是Flag标签,其在蛋白质纯化、鉴定和功能分析领域被广泛使用。这是一个八肽序列(DYKDDDDK),其单克隆抗体和多克隆抗体很容易买到。我们发现由12~15个氨基酸组成的多肽在多数情况下都是非常好的免疫原。由30~35个氨基酸组成的较长多肽,虽然本身化学合成受限,但也是非常好的免疫原,其优点是可能会形成相关的二级结构。多肽免疫原使用受限是因为其线性表位序列短,在一个完整的蛋白质抗原中不易被识别。因而由多肽产生的抗体趋向于识别线性表位,总的来说,在免疫印迹实验和其他识别变性蛋白的抗体实验中效果非常好。然而,由多肽产生的抗体通常不能识别蛋白质构象,因此不太可能和天然分子反应。这样的抗体往往没有功能,不能用于流式细胞仪。但是应该指出的是,在有些情况下多肽免疫原确实能够生成能识别天然蛋白质的抗体。例如,当蛋白质抗原的线性表位没有被其三级结构所掩盖的时候。

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用户评论 (总计30条)

 
 

  •   很适合专业人士阅读 实验步骤很详尽 适合好好好好研究。
  •   该书实验过程讲述比较详细,知识点也比较系统
  •   内容翔实,步骤明确,是做单抗、多坑、蛋白质研发人员的好帮手!
  •   正在看,感觉还可以。对于提高技术应该有收获。
  •   还不错,实用全面
  •   看你需要什么内容了,对我们还是比较有用的
  •   很好很划算!希望以后还有这么划算的@
  •   因为觉得有用才买的,感觉很不错
  •   物流相当快,书的质量也很好
  •   这本书非常不错,对我很有帮助,非常喜欢。做抗体的可以一看。
  •   对于第一次接触抗体的就是想了解一下,目前看起来还不错
  •   总体来说写得还可以,但可惜的是纯化部分写得太简略了!
  •   这是一本很实用的书!理论和实验步骤都有很详细的介绍和比较!
  •   讲的太泛泛了,实验方案不是太别详细
  •   物流不错,没有损坏的地方。书的内容有点简单,适合入门学习,在介绍里如能加入相关的水平等级介绍就更好了
  •   内容很不错,全面清晰。纸张稍显粗糙,中文翻译的很生硬,读起来不符合阅读习惯很吃力。
  •   感觉内容比较详细,对入门级别的自己还是比较有用的。
  •   不错的工具书,实验室买上一本备查。
  •   书内容还行 面太多了!过于简单!
  •   感觉当当网的送货速度不如以前快了。而且总是感觉印刷质量总是那么的差强人意!希望,他能更好。否则,客户会越来越少!
  •   就是为啥纸都比较黄
  •   果然是实验指南,可以写得都是理论,没见方案,没有借鉴作用!书本纸张质量不行,黄黄的,似乎放了多少年似的,价格稍微偏贵
  •   书不错,不过包装实在不敢恭维,买了6本书,就一层纸箱子装,我收到箱子都破了个大洞,书也漏出来了,边角皱皱巴巴的。我还以为就我的这个是这样,恰巧碰的我一个同事,她也买的书,也在抱怨包装太差了,箱子破了个大洞,太不负责了。
  •   速度快的
  •   还不错,送货也挺快的
  •   这本真不错
  •   抗体制备与使用实验指南
  •   工作前地充电用!
  •   不错一般抗体制备入门书。
  •   帮研究室买的
 

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